肠杆菌科细菌 ESBLs 和 AmpC 酶检测及耐药性分析

肠杆菌科细菌ESBLs和AmpC酶检测及耐药性分析

武晓敏

【摘 要】【摘要】目的 检测分析肠杆菌科细菌ESBLs和AmpC酶，并对其耐药性进行分析，明确耐药特征与耐药机制。方法 【期刊名称】河南医学研究 【年(卷),期】2015(000)002 【总页数】3

【关键词】【关键词】肠杆菌科细菌; AmpC酶;耐药性

抽取濮阳市人民医院收治的40例患者标本培养的120株肠杆菌，经双纸片确证试验检测细菌ESBLs，经双纸片氯唑西林增效试验检测AmpC酶，最后经MIC法测定菌株的13种抗菌药物耐药性。结果 120株肠杆菌中，ESBLs菌检出率为50.0%，AmpC酶菌检出率为45.0%。单产ESBLs菌、单产AmpC酶菌，产ESBLs + AmpC酶菌对阿米卡星、氨曲南、头孢噻肟、氨苄西林耐药率与非产酶菌的耐药性相比，差异有统计学意义(P＜0.05) ;且高产AmpC酶菌的4重耐药率与8重耐药率明显高于非产酶菌组(P＜0.05)。结论 肠杆菌科细菌耐药的主要原因为ESBLs和AmpC酶，可指导临床对症用药治疗。

随着临床用药技术水平的不断进步发展，以及人们对健康重视程度的不断提高，临床治疗中，为了满足患者的健康需求，抗菌药物的使用越来越多，这也导致细菌耐药性不断增加，其中最具代表的是肠杆菌科细菌ESBLs和AmpC酶菌耐药性情况明显增加，增加临床控制以及治疗难度［1－2]。本次研究重点对肠杆菌进行检测并分析耐药性，指导临床用药。

1 资料与方法

1.1临床资料 统计濮阳市人民医院2012年4月至2014年6月收治的40例患者标本培养的120株肠杆菌，菌种类型:克雷伯菌32株，耶尔森菌7株，沙雷菌12株，变形菌6株，大肠埃希菌58株，其他5株。所有菌种均经微生物鉴定仪器以及相应配套身鉴定卡确认。

1.2检测方法 所抽取菌株的ESBLs菌表型由双纸片确诊试验检测，AmpC酶菌则由双纸片氯唑西林增效试验检测，统计检出率，并实施药敏试验，对比分析产酶菌以及非产酶菌的试验结果。

ESBLs菌检测方法:双纸片确诊试验检测，首先根据纸片扩散法表型筛选，之后经确证试验进行检测，筛选时若发现头孢他啶抑菌环直径小于22 mm，头孢噻肟抑菌环直径小于27 mm，则表明菌株中有可能产ESBLs。确证试验即在上述药物基础上增加克拉维酸，与未放入克拉维酸的抑菌环进行对比，若增加值大于5 mm，则表明产ESBLs。

AmpC酶菌检测:由双纸片氯唑西林增效试验检测抽取菌株，先根据纸片扩散法表型筛选，并采用改良后的Hodge试验确证。初次进行筛选时，统计头孢西丁抑菌环直径小于18 mm，则表明菌株中有可能产AmpC酶菌，再次经确证试验后，头孢西丁抑菌环变化值大于2 mm，则可明确产AmpC酶菌。

氯唑西林增效试验检测AmpC酶，采用灭菌蒸馏水分别将氯唑西林制成4、6、8、12 μg/μl的溶液，采用微量加样器，从中取出20 μl的氯唑西林溶液，分别将其加在标准ATM、CRO、CTX、CAZ药敏纸片中心，分别制成240、200、160、120、80 μg氯唑西林的复合纸片中，放于超净台中晾干后，－20°C冰箱中留作保存。尽量将标准药敏纸片放在接种好的同一M2H平皿上，尽量保证复合纸与相应标准药敏纸片对同一受试菌株抑菌环等具有可比性。若含有氯

唑西林复合纸片的抑菌环直径大于相应的标准纸片抑菌环直径5 mm，判定为阳性，相反则判定为阴性。

1.3统计学处理 采用SPSS 13.0统计学软件进行数据处理分析，定量资料以(±s)表示，组间比较采用t检验，定性资料的组间比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 AmpC酶与ESBLs酶的检出率 120株肠杆菌中，ESBLs菌60株，检出率为50. 0%，AmpC酶菌54株，检出率为45. 0%。单产ESBLs菌38株，所占比例为31. 7%，单产AmpC酶菌32株，所占比例为26. 7%;产ESBLs菌与AmpC酶菌23株，所占比例为19. 2%;不产ESBLs菌与AmpC酶菌28株，所占比例为23. 3%。见表1。

2.2药敏试验结果 单产ESBLs菌、单产AmpC酶菌，产ESBLs + AmpC酶菌对阿米卡星、氨曲南、头孢噻肟、氨苄西林耐药率与非产酶菌的耐药性相比，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

2.3分析受检菌的多重耐药性 120株受检菌的4重耐药率为57.1%，8重耐药率为47.5%，单产AmpC酶菌多重耐药率与非产酶菌率对比，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

3 讨论

当前临床关于细菌耐药性的研究中，重点内容之一为β－内酰胺酶所产生的耐药性。β－内酰胺酶类为临床常用的抗菌药物，对其有最大威胁性的是C类头孢菌素酶超广谱β－内酰胺酶(可简称为ESBLs)、AmpC β－内酰胺酶(可简称为AmpC酶)［3]。AmpC酶主要是由不动杆菌、肠杆菌、铜绿假单胞菌等革