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FlowJo 中文实用手册

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双击淋巴细胞门,在X轴选择FL1-H,Y轴选择Histogram; Sample 1是未染色的阴性对照, 用来确定抗体染色的阴性和阳性的界限。用双分门工具设门, 门的位置如下图所示。设门完成后,在工作台中右键单击FL1-H+节点,在下拉菜单中选择“Rename”,将其重命名为CD8+;同样的方法将FL1-H-节点重命名为CD8-

2. 添加统计数据

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在工作台中单击选中CD8+节点,到常用工具栏中点击添加统计数据按钮,

打开添加统计数据对话框。选择Median(中位数),在Parameter(参数)栏中选择FL1-H,点击添加。这样就给CD8阳性细胞群添加了FL1-H荧光强度的中位数。如下图所示:

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在工作台中单击选中Σ(FL1-H):Median节点,将其拖到CD8-节点上,给CD8阴性细胞群添加FL1-H荧光强度的中位数。如下图所示:

3. 设门分析的批处理

在工作台中单击选中Sample 1样本下的“淋巴细胞”节点,将其拖到Sample 2样本上,这样就对Sample 2设了一个“淋巴细胞”门。这个淋巴细胞门的位置与Sample 1 中淋巴细胞门的位置相同。如下图所示:

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在工作台中单击选中Sample 1样本下的“淋巴细胞”节点,将其拖到组空间的“Titration Data”组上,这样就对该组中的所有样本都设了一个“淋巴细胞”门,这个淋巴细胞门的位置与Sample 1 中淋巴细胞门的位置相同。如下图所示:

按住ALT键,在工作台中单击Sample 1 样本下的“淋巴细胞”节点,能够将淋巴细胞节点及其以下的所有节点全部选中,然后将其拖到组空间的Titration Data组上。这样就对该组中的所有样本都进行了与Sample 1样本中一样的设门和添加统计数据。如下图:

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二、表格分析的批处理

1. 在表格编辑器中导入需要进行表格分析的统计数据: 在工作台的常用工具栏点击表格编辑器按钮

,打开表格编辑器

在工作台的样本空间中,将Sample 1样本的CD8+节点和CD8-节点及其下方的Σ(FL1-H):Median节点拖到表格编辑器中,如下图所示:

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双击淋巴细胞门,在X轴选择FL1-H,Y轴选择Histogram;Sample1是未染色的阴性对照,用来确定抗体染色的阴性和阳性的界限。用双分门工具设门,门的位置如下图所示。设门完成后,在工作台中右键单击FL1-H+节点,在下拉菜单中选择“Rename”,将其重命名为CD8+;同样的方法将FL1-H-节点重命名为CD8-
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