人类白细胞抗原-G1蛋白纯化及其免疫耐受机制初探
毕丽丽;孙玉洁;孔祥瑞;高钰;马锡慧;韩永;肖漓;石炳毅
【期刊名称】《实用器官移植电子杂志》 【年(卷),期】2017(005)002
【摘要】目的原核体系诱导表达并纯化人类白细胞抗原-G1(human leukocyte antigen-G,HLA-G1)蛋白,研究HLA-G1分子对人B淋巴细胞内白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)表达水平的影响,进而探究HLA-G1在肾移植受者中B细胞介导的免疫耐受机制.方法通过原核表达体系,构建表达并纯化HLA-G1蛋白,经过蛋白免疫印迹试验(Western Blot)鉴定后,与人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)共培养,利用流式细胞仪检测B淋巴细胞内IL-10的表达情况.结果十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)、Western Blot结果表明,纯化后的蛋白分子量大小约为38.2 kDa,符合HLA-G1蛋白的分子量;人PBMC与HLA-G1蛋白共培养后,随着HLA-G1蛋白浓度的升高(浓度梯度:0、50、100和200 ng/ml),B细胞内IL-10的表达水平明显增加,分别为0.1%、0.36%、0.57%、0.73%.结论通过原核表达系统获得HLA-G1蛋白,纯度达95%以上,HLA-G1蛋白与人PBMC共培养后,可诱导B淋巴细胞表达IL-10,并具有浓度依赖性,提示其对肾移植免疫耐受的建立具有重要作用. 【总页数】4页(112-115)
【关键词】肾移植;人类白细胞抗原-G1蛋白;纯化;B淋巴细胞;白细胞介素-10;免疫耐受
【作者】毕丽丽;孙玉洁;孔祥瑞;高钰;马锡慧;韩永;肖漓;石炳毅
人类白细胞抗原-G1蛋白纯化及其免疫耐受机制初探
