非洲紫罗兰不定芽诱导与试管内开花技术研究
王小国
【摘 要】［摘 要］ 以非洲紫罗兰叶片和叶柄为外植体，以MS为基本培养基，比较了外植体类型、接种方式和植物生长调节剂配比对不定芽发生的影响，并初步探讨了试管内开花所需环境条件。结果表明：非洲紫罗兰叶片为较好的外植体类型，可以直接诱导产生不定芽，培养基配方为 MS＋6－BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L时不定芽诱导率较高；且接种方式对不定芽的诱导有重要影响，以叶片背面向下较好；活性炭有利于试管苗的生长；非洲紫罗兰试管内开花的适宜环境条件是光照时间14h／d，光照强度4 000lx，白天温度28℃，夜间温度20℃。
【期刊名称】林业实用技术 【年(卷),期】2014(000)007 【总页数】3
【关键词】［关键词］ 非洲紫罗兰 不定芽诱导 试管内开花
非洲紫罗兰（Saintpaulia ionantha Wendl．）又名非洲堇，原产东非，为苦苣苔科非洲苦苣苔属多年生草本植物。全株被绒毛，小巧玲珑，花色斑斓，花形多样，耐干旱阴凉，忌高温，宜在散射光下生长。非洲紫罗兰是国际上著名的室内盆栽花卉，被誉为“室内花卉皇后”。由于其花色种类众多，因此可以作为花显色机制良好的研究材料［1］。
非洲紫罗兰单瓣花能结籽，重瓣花不结籽。因此常规繁殖速度慢，使新品种推广和商业化利用受到限制［2］，而组培快繁技术可解决这一难题。试管内开花是一种新型的技术，试管开花的植物不仅可应用于商业化生产，而且还可用于
试管杂交育种和预测花色花型，并为花卉花期调控机理的研究提供有效的平台［3－4］。目前，已有多种植物诱导出了试管内开花植株［5－6］，但是尚未见非洲紫罗兰试管内开花的报道。本研究以非洲紫罗兰叶片、叶柄为外植体，进行了不定芽的诱导、增殖及试管内开花试验，旨在为非洲紫罗兰工厂化生产和开花机理研究提供参考。
1 材料和方法
1．1 试验材料
以市售盆栽非洲紫罗兰（重瓣，开蓝紫色花）作为供试材料。 1．2 试验方法
1．2．1 外植体的消毒和初代培养 采集紫罗兰的叶片、叶柄置于烧杯中，用纱布封口后，流水冲洗约2h。用滤纸条将水分吸干后，无菌条件下，对外植体进行表面消毒（先用75%酒精消毒30s，无菌水冲洗2次，再用0．1%升汞溶液消毒8～10min，无菌水冲洗数次，最后将材料接种于培养基上，培养基配方为MS＋6－BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L。采取不同的接种方式：叶柄竖接、叶片水平接（叶背向下）和叶片（带叶柄）竖接。将接种后的材料置于光照培养箱（GXZ－260型）进行不定芽诱导培养，培养温度25℃左右，光照强度约4 000lx。4个月后观察结果并进行统计。
不定芽诱导率（%）＝（发生不定芽的外植体数／供试外植体总数）×100% 1．2．2 继代增殖培养 对诱导出的非洲紫罗兰不定芽 进 行 增 殖 培 养，以 MS＋ 6－BA0．5mg／L ＋NAA0．1mg／L＋ AC0．3%作为继代培养基，温度白天25℃，夜间20℃，光照强度4 000Lux，光照时间8h／d。
1．2．3 试管内开花诱导 通过控制光照时间和温度条件，确立试管内开花较好
地环境条件。
2 结果和分析
2．1 外植体类型对不定芽诱导的影响
将非洲紫罗兰叶片和叶柄两种外植体，分别接种于诱导培养基上（叶片背面向下接种、叶柄竖直接种）进行离体培养。结果发现，叶片培养4个月后，从叶片上发生出大量不定芽，而叶柄则全部死亡，说明叶片诱导不定芽的效果明显好于叶柄，是适宜的外植体（见图1）。 2．2 不同接种方式对不定芽诱导的影响
以非洲紫罗兰叶片为外植体，采用竖直和水平两种方式接种于诱导培养基上进行培养，约4个月后发现在相同的培养基上，竖直接种的叶片未见不定芽出现，只见叶柄基部有毛状物生出，而水平接种的叶片背面诱导出大量不定芽，不定芽诱导率较高（见图2a）。 2．3 培养基对试管苗增殖的影响
诱导出的不定芽在增殖培养基 MS＋6－BA0．5 mg／L＋NAA0．1mg／L 和 MS＋6－BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L＋AC0．3%上生长一段时间后，发现添加了活性炭（AC）的试管苗生长健壮，叶色深绿，增殖速度也较快。说明活性炭有利于试管苗的增殖和生长。 2．4 试管内开花的环境条件
植物的开花现象受光照、温度、营养条件等多种因素的影响。本研究在光照14h／d，光照强度4 000 lx，白天温度28℃，晚间温度20℃条件下，成功诱导了非洲紫罗兰的试管内开花（如图3所示）。
3 讨论
非洲紫罗兰不定芽诱导与试管内开花技术研究
