微生物的接种、分离纯化与培养方法
微生物知识及检查方考试试题答案
部门________________ 姓名 ___ 成绩 ______ 一、填空（40分，每空1分）
1. 微生物限度检查应在环境洁净度 10000 级下局部洁净度 100 级的单向流空气区域内进行。
2. 微生物限度检查法中细菌培养温度为 30-35 ℃；控制菌培养温度为 30-35 ℃；霉菌，酵母菌培养温度为 23-28 ℃。
3. 具抑菌活性的供试品，常用消除抑菌活性的方法有： 培养基稀释法 、 离心沉淀法 、 薄膜过滤法 、 中和法 。
4. 采用薄膜过滤法，滤膜孔径应不大于 0.45μm ，直径一般为 50mm 。
5. 供试液制备若需用水浴加温时，温度不应超过 45 ℃。供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过 1 小时。
6. 培养基若保存于非密闭容器中，一般在 三周 内使用，若保存于密闭容器中，一般在 一年 内使用。
7. 洁净区测沉降菌时，注入培养基的平皿应放置 0.5 小时。
8. 制备的菌液若在室温下放置，应在 2 小时内使用，若保存在 2~8 ℃，可在24小时内使用。
9. 在验证薄膜过滤时在 最后一次 的冲洗液中加入小于 100cfu 的试验菌过滤。 10. 微生物限度检查项目包括 细菌数 、 霉菌数 、 酵母菌数 及 控制菌检查 。 11. 试验组的菌回收率不低于 70% 。
12. 检查大肠埃希菌时，应做 阴性 对照和 阳性 对照。
13. 配制培养基时，要填写 培养基配制记录 ，记录内容包括： 名称 、 配制量 、 灭菌中重要参数 、 配制日期 、 配制者 。
14. 在收到检定菌后，保管员要在保存菌种容器外加贴 标签 ，内容为 名称 、 编号 、 购买日期 ，同时还要填写 菌种购进传代记录 菌种保存管理记录。
15. 离心沉淀法是取一定量的供试液， 500转/分钟 离心 3分钟 ，取全部上清液混合。
二、判断题（20分，每题2分）
1. 平皿法操作时应先注入培养基，再加入1ml供试液。 （ × ） 2. MUG培养基的试管于5小时，24小时在365nm紫外线下观察荧光。 （ × ） 3. 阴性对照取试验用的稀释液1ml，置无菌平皿中，注入培养基，凝固，倒置培养。（ √ ） 4. MUG阳性，靛基质阴性，判未检出大肠埃希菌。 （ × ） 5. 口服给药制剂的标准细菌每1g不得过1000个。每1ml不得过100个。 （ √ ）
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微生物的接种、分离纯化与培养方法
6. 微生物限度检查应在环境洁净度100级以下的局部净度10000级的单向流空气区域内进行。 （ × ）
7. 菌种每三周传代一次，传代不超过5次。 （ × ）
8. 从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为0代。 （ √ ） 9. 做阳性对照时，试验加菌量为50~100cfu。 （ √ ） 10. 如MUG阳性、靛基质阳性，判未检出大肠埃希菌。 （ √ ） 三、选择题（20分，每题2分）
1. 进行供试品控制菌检查时，阳性对照试验的加菌量为（ C ）
A、10～50cfu B、50～100cfu C、10～100cfu 2. 制备菌液时所用的稀释液是（ A ）
A、0.9%无菌氯化钠溶液
B、pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液。 C、0.1%蛋白胨水溶液。
3. 检定菌无特殊说明时要将购来的试管斜面放入冰箱（ D ）冷藏保存。
A、3~4℃ B、4~6℃ C、3~9℃ D、2~8℃ 4. 一般供试品的检验量为（ C ）
A、1g或1ml B、5g或5ml C、10g或10ml
5. 关于口服给药制剂微生物限度标准，下列说法正确的是（ ABC ）
A、细菌数每1g不得过1000个，每1ml不得过100个。 B、霉菌和酵母菌每1g或1ml不得过100个。 C、大肠埃希菌每1g或1ml不得检出。 6. 微生物限度检查所用的稀释剂（ A ）
A、pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 B、pH6.8无菌磷酸盐缓冲液 C、0.9%无菌氯化钠溶液 D、pH7.6无菌磷酸盐缓冲液 7. 常用的灭菌方法有（ ABCDE ）
A、湿热灭菌法 B、干热灭菌法 C、辐射灭菌法 D、气体灭菌法 E、过滤除菌法 8. 细菌的培养时间一般为（ C ）
A、1天 B、2天 C、3天 D、4天 9. 霉菌的培养时间一般为（ D ）
A、2天 B、3天 C、4天 D、5天 10. 洁净区的温湿度应该为（ C ）
A、温度13~15℃，相对湿度50~70% B、温度15~18℃，相对湿度50~70% C、温度18~26℃，相对湿度45~65% D、温度15~18℃，相对湿度45~65%
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