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生物技术一班发酵工程实验计划方案
、实验日程表
序号 实验项目 时间 实验内容安排 1、 固体培养基配制 500mL/组，分装2瓶； 1 培养基制 备与火菌 2、 培养皿清洗及包扎 预计8学 时 支； 10 副/组；无菌水 90mL/瓶，9 mL/试管 共63、 1 mL or2 mL 吸管包扎8支/组； 4、 液体培养基制备：500ml/组，分装8瓶，灭菌0.1MPa,20min. 1、菌种的分离纯化：超净工作台消毒（UV照射20min ）乍75%乙 醇擦2 菌种分离 拭台面；分离样品-无菌水溶解 （稀释10-2倍）-涡旋震荡 预计4学 时 5min ;倒平板（10副平皿/组）—平板划线分离— 30C倒置培养— 目标菌株获得-制片及观察（显微摄影） 1、 接种准备工作：超净工作台消毒 擦拭台面。 。 （UV照射20min ） - 75%乙醇 3 种子制备 2、 纯种培养接种：平板单一菌落—种子培养基（ 预计4学 时 旋震荡3-5min ； 3、 摇瓶培养：摇床设置及调节（ 养。 1、 发酵培养基配制：20Lor35L。 2环/瓶）—涡 30C, 200r/m ）-摇瓶固定- 启动培2、 发酵罐操作培训： 发酵罐初始状态检查及调节-清洗 （清水 冲洗2-3遍）-发酵罐运行启动-发酵罐运行参数设置-空 罐灭菌（0.15MPa,20min ）—进料—实罐灭菌（ 0.1MPa维持 30min ）—冷却—火焰封口接种—发酵参数稳定状态调节与 发酵罐结 构4 认识、操 维持。 3、 发酵取样：取样管火菌—取样—再火菌； 预计8学 时 作规程及 分4、 发酵中间过程分析 （0 hour）: pH测定（pH计or精密试纸）； 酸批发酵 操作 度（中和法）；酶浓度测定（福林酚法）；菌体浓度测定（A600 光密度法） 5、 中间取样：每间隔 4-6 次； 6、 发酵结束工作：器皿、设备还原，环境清洁 4h,取样管火菌—取样—再火菌 .共计 各类专业好文档，值得你下载，教育，管理，论文，制度，方案手册，应有尽有
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二、 实验分组
第一组：薛盛、张川、周宁、殷清玉宇、周辰栋、杨朝伟、吴迪、 刘洋、
刘丽婷（负责人：吴迪）
第二组：张怡、沈飞、徐依依、陆佳桦、吴冰燕、王芸清鉴、叶晨、 汪素
红、刘杏、刘文跃 （负责人：沈飞）
第三组：田玉寒、闻宁、林飞敏、李林棋、丁铭、周欣欣、罗斯、
蒋秋艳、刘宇霞 （负责人：田玉寒）
三、 时间分配
前三周的周二晚发酵理论课照上，因此各组的固定实验时间如下： 第一组固定实验时间：周一下午、周三晚上 第二组固定实验时间：周二中午、周四上午 第三组固定实验时间：周五下午、周五晚上 后三周的周二晚无理论课，各组集中在周二晚实验
前三周每周安排两次实验，以获取更多的实验数据，后三周每周一次实验
几个重要时间节点为：第10周正式进入实验程序；
第13周获得目标菌株1株； 第14周完成种子的摇瓶培养； 第15周分别完成上罐发酵； 第16周实验收尾工作。
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集体
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四、实验内容
实验一产蛋白酶微生物菌株的分离
【实验材料】 1、 采样样品
食堂泔脚等残存蛋白质丰富的环境周围的土壤或其它蛋白质腐败材 料。 2、 培养基
(1) 增殖培养基：蛋白胨10 g/L，牛肉膏3 g/L，氯化钠5 g/L， pH 7.0 ?7.2，O.IMPa,灭菌 20min。
(2) 分离纯化培养基：酪蛋白 10 g/L，Na2HPO4 6 g/L，KH2PO4 3 g/L，NaCl 0.5 g/L ，NH4C1 1 g/L，FeSO4 0.025 g/L，酵母膏 0.2 g/L，MgSO4 0.24 g/L，CaCI2 0.011 g/L，溴百里香酚兰 0.05 g/L， 琼脂 20 g/L，pH 7.0 ?7.2，0.1MPa,灭菌 20min。
(3) 菌种保存培养基：蛋白胨10g/L，牛肉膏3 g/L，NaCl 5g/L， 琼脂 20g/L，pH 7.0 ?7.2，0.1MPa,灭菌 20min。
(4) 无菌水：90 mL无菌水/250 mL三角瓶；9 mL无菌水/试管6支。
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11级生物技术1班发酵工程实验计划方案
