通过激活内皮细胞介导枸杞多糖改善心肌梗死大鼠心肌缺血的研究 - 周鑫 - 图文

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第39卷第4期

CHINESE

中华中

医药学刊

MEDICINE

Vol．39No．4Apr．2021

2021年4月AＲCHIVESTＲADITIONALCHINESE

DOI：10．13193/j．issn．1673-7717．2021．04．056

通过激活内皮细胞介导枸杞多糖改善

心肌梗死大鼠心肌缺血的研究

1，212

周鑫，于睿，林萍

（1．辽宁中医药大学，辽宁沈阳110032）辽宁沈阳110847；2．辽宁中医药大学附属医院，

摘要：目的观察枸杞多糖对急性心肌梗死大鼠急性期及慢性期心肌缺血的改善作用，探讨其作用机制。方法通过

冠脉血管结扎法建立心肌梗死大鼠模型，模型建立成功后，随机分为枸杞多糖治疗组（LBP组）、心肌梗死模型组（MI

LBP组给予枸杞多糖100mg/kg灌胃，MI组和sham组给予等量生理盐水灌胃，连续给组），另建立假手术组（sham组），

1周、3周、4周收集各组心脏结构参数，ELISA检测血清中cTnT、BNP表达，HE染色观察大鼠心药4周，分别于术后3d、

WesternBlot及qPCＲ检测大鼠心肌组织中CD133、VEGFＲ2的表达。结果心肌梗死后大鼠LVDD、肌组织病理变化，

LVDS明显升高，EF、FS明显降低，BNP表达呈上升趋势，血清中cTnT、心肌细胞损伤严重，经枸杞多糖药物干预后，心肌

LBP组大鼠EF、FS明显升高，BNP上升梗死后大鼠心室收缩功能及损伤程度明显得到改善，与MI组相比，血清中cTnT、

VEGFＲ2蛋白表达增加明显。结论枸杞多糖可以明显改善心肌趋势不明显，心肌细胞损伤程度较轻，心肌组中CD133、

VEGFＲ2蛋白表达，梗死后大鼠心肌缺血损伤，这种保护可能通过增加CD133、激活内皮细胞功能，促进新生血管生成及

血流灌注来实现的。

关键词：心肌梗死；心肌缺血；枸杞多糖；内皮功能

7717（2021）04-0219-06中图分类号：Ｒ285．5文献标志码：A文章编号：1673-

ImprovingMyocardialIschemiainＲatswithMyocardialInfarctionbyActivating

EndothelialCells－MediatedSputumPolysaccharide

ZHOUXin1，，YUＲui1，LINPing2

（1．LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shenyang110847，Liaoning，China；

2．AffiliatedHospitalofLiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shenyang110032，Liaoning，China）

“兴辽英才计划”项目（XLYC1802004）；辽宁省自然科学基金（2019－ZD－0435）基金项目：辽宁省

男，辽宁沈阳人，副主任医师，博士研究生，研究方向：中西医结合心血管疾病。作者简介：周鑫（1980－），

通讯作者：于睿（1969－），女（锡伯族），辽宁阜新人，教授、主任医师，博士研究生导师，博士，研究方向：中西医结合心血管方向疾疾。

E-mail：yurui1969@163．com。［13］喻斌，蒋宝平，阮鸣．川芎嗪和不同剂量冰片配伍对全脑缺血/

．中国药理学通报，再灌注大鼠脑区特异性保护作用研究［J］2017，33（4）：589－591．

［14］陈振翼，刘月，等．复元醒脑汤对急性脑梗死（风痰瘀阻方邦江，

．中国中医急症，2017，26证）患者凝血功能影响的临床研究［J］（8）：1317－1319．

［15］梁天文，黄锦桃，等．健脾化湿泄浊方对实验性高尿酸胡黎平，

J］．热带医学杂志，2017，血症大鼠肾功能及XOD活性的影响［17（1）：5－7．

［16］黄伟，毛媛媛．疏肝解郁胶囊联合艾司唑仑治疗卒中后滕海英，

J］．中西医结合心脑血管病杂志，2018，睡眠障碍的疗效观察［16（8）：1105－1107．

［17］凌丽，陈淼，等．复元醒脑汤对糖尿病脑梗死大鼠脑组沈俊逸，

织梗死体积及形态学影响的实验研究［J］．中国中医急症，2018，27（2）：189－193．

［18］孙丽华，沈俊逸，等．复元醒脑汤干预糖尿病脑梗死大叶苗青，

2019，鼠缺血脑组织血管新生的实验研究［J］．中国中医急症，28（2）：192－195，199．

［19］FENGX，ZHAOT，LIUJ，etal．CerebralVenousSinusThrombosis

withCerebralHemorrhagePresentingwithStatusEpilepticusinEar-lyPregnancy［J］．ClinicalLaboratory，2018，64（4）：611－614．

［20］高虹，邹科，周新欢．安神解郁汤联合盐酸曲唑酮对肝郁血虚型

更年期抑郁症患者睡眠质量、神经内分泌系统及子宫内膜厚度J］．陕西中医，2018，39（10）：1345－1347．的影响［

［21］王丹，冯凯．老年血管性帕金森综合征的临床特点分析于海华，

［J］．中华老年心脑血管病杂志，2019，21（10）：1067－1069．

［22］陈倩倩，刘畅，等．“貌似”昏迷的丘脑病变睡眠觉醒障孙晴晴，

J］．中风与神经疾病杂志，2018，35（6）：553－554．碍特点分析［

［23］成杰，等．正念音乐训练对脑出血急性应激障碍王倩，王卫亮，

睡眠障碍患者睡眠—醒觉行为的作用［J］．中国神经精神疾病2018，44（5）：288－293．杂志，

［24］MELVIN，PAＲASＲAM，ALANZ，etal．SleepDisordersandStroke：

DoesTreatmentofObstructiveSleepApneaDecreaseＲiskofIsche-micStroke？［J］．Currenttreatmentoptionsinneurology，2019，21（7）：29．

［25］王安平，神经损伤毛善平．急性小脑出血患者失眠与出血部位、

．海南医学，2017，28（16）：程度和IL－1β浓度的关系［J］2604－2608．

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Abstract：ObjectiveToobservetheeffectofLyciumbarbarumpolysaccharidesontheacuteandchronicmyocardialischemiainratswithacutemyocardialinfarctionandexploreitsmechanism．MethodsAratmodelofmyocardialinfarctionwasestablishedbycoronaryvascularligation．Aftersuccessfulestablishment，themodelwasrandomlydividedintoLyciumbarbarumpolysaccha-ridetreatmentgroup（LBPgroup），myocardialinfarctionmodelgroup（MIgroup）andshamoperationgroup（shamgroup）．LBPgroupwasgivenLyciumbarbarumpolysaccharide（100mg/kg）．MIgroupandSHAMgroupweregiventhesameamountofnor-malsalinefor4weeks．Thecardiacstructuralparametersofeachgroupwerecollectedat3d，1，3and4weeksafteroperation．TheexpressionsofcTnTandBNPwereobservedbyHEstaining．TheexpressionsofCD133andVEGFＲ2inratmyocardiumweredetectedbyWesternBlotandqPCＲ．ＲesultsAftermyocardialinfarction，LVDDandLVDSweresignificantlyincreased．EFandFSweresignificantlydecreased．SerumcTnTandBNPexpressionincreased，andmyocardialcellinjurywassevere．Afterpolysaccharideintervention，theventricularsystolicfunctionaftermyocardialinfarctionwassignificantlyimproved．ComparedwiththoseoftheMIgroup，EFandFSinLBPgroupweresignificantlyincreased，serumcTnTandBNPwerenotsignificantlyin-creased，myocardialcelldamagewasmild，andexpressionsofCD133andVEGFＲ2proteinincreasedsignificantlyinMIgroup．ConclusionLyciumbarbarumpolysaccharidecansignificantlyimprovemyocardialischemicinjuryinratsaftermyocardialinfarc-tion．ThisprotectionmaybeachievedbyincreasingtheexpressionsofCD133andVEGFＲ2protein，activatingendothelialcellfunction，andpromotingneovascularizationandperfusion．

Keywords：myocardialinfarction；myocardialischemia；Lyciumbarbarumpolysaccharide；endothelialfunction心肌梗死是因严重的心肌灌注减少或中断导致部分心肌的急性缺血坏死，其主要病理机制是存在大量炎性纤维帽斑块破裂出血及内皮功能障碍而导致局部急性血栓形成。其主要表现为心肌的急性损伤及心室收缩及舒张功能障碍，流行病学调查表明，心血管疾病是我国居民死亡的首位病因，占居民疾病死亡总数的40%以上，其中急性心肌梗死呈快速上升趋势，尽管介入手术的出现大大改善了急性心肌梗死的病死率，但梗死后的心室重构及心衰预防不足仍具有普遍性。枸杞多糖（lyciumbarbarumpolysaccharide，LBP）作为枸杞中的有效成分，具有抗氧化、抗衰老、缓解机体疲劳、调节血脂、调节血糖等

［1－3］

。有研究发现LBP可以抑制因缺血导致的多种生物活性

心肌损伤，但其机制有待详实。VEGFＲ2作为重要的血管生

成因子，有研究发现在心肌处于缺血状态下，会刺激骨髓中内皮祖细胞的活化，大量释放VGFＲ2，促进局部血管再生，在以往的研究发现，心梗后自体移植EPCs可以改善心室收缩及舒

［5－7］

。本研究通过观察枸杞多糖对急性心肌梗死大鼠张功能

心肌缺血损伤及心室功能的影响，进一步探讨激活血管内皮功能在其中的调控机制。1材料与方法

1．1实验动物及分组SPF级SD大鼠60只，雄性，体质量250～300g，由辽宁中医药大学实验动物房提供［生产许可证号：SCXK（辽）－2013－0001，使用许可证号：SYXK（辽）－

，2013－0007］在SPF级设施中饲养，食水充足，温湿度适宜，自由取食，适应饲养1周后，采用冠脉结扎的方式建立MI模型，

通过心脏超声结合大鼠体表心电图判断模型是否成功，采用随

n=机数字表法将建模成功的大鼠随机分为模型组（MI组，20）、n=20），枸杞多糖干预组（LBP组，另建立假手术组（sham

n=20）。组，

1．2心肌梗死大鼠模型制备七氟烷吸入式麻醉大鼠，仰卧位固定大鼠于手术台，颈部及胸部剃毛备皮，连接动物呼吸机、麻醉机、监护仪，于胸骨左缘3mm处纵向剪开皮肤约4cm，钝性分离皮下组织及肌层。于第3助间剪暴露胸膜。并于呼气

于相刺破胸膜，暴露心脏。寻找左前降支冠脉血管（LAD），

LAD根部于可吸收缝合线结扎（不可打结），关胸，逐层缝合肌肉及皮肤，皮下注射青霉素8U/kg抗感染，待大鼠清醒后，清

［4］

理呼吸道异物，撤机。

1．3体表心电图数据采集采用无创心电监护仪记录并分析大鼠综合导联心电图（ST段改变）。

1．4心脏超声动态观察麻醉状态下，将大鼠固定于手术台，应用飞利浦公司CX－50超声心动仪，探头型号为S－12－4，频率4～12MHz。测定左心室舒张期末径（leftventricularinter-naldimensiondiastoleLVDD）、左心室收缩期末径（leftventricu-larinternaldimensionsystoleLVDS）、左心室射血分数（Leftven-tricularejectionfractionLVEF）、左心室短轴缩短分数（Leftven-tricularshortaxisshorteningfractionLVFS）。连续取3个心动周期的平均值。

1．5样品采集与检测各组大鼠于术后3d、1周、3周、4周分别处死4～6只大鼠，取血液分离血浆低温冰箱保存，用于ELISA检测，后于腹主动脉注入大量冷冻生理盐水，直至流出清亮液体，剥离心脏，于PBS缓冲液中，一部分于甲醛中固定用于HE染色，另一部分锡纸包裹于－80℃冰箱保存用于WesternBlot及qＲT－PCＲ检测。1．6ELISA检测血清中Tn－T、BNP表达选用ELISA试剂

BNP进行检测，盒对血清中cTnT、操作步骤均按试剂盒操作说

明书进行：将试剂盒平衡至室温（20～25℃）后取出所需反应板，在相应反应板孔中先后加入100μL标准品和100μL稀释后标本，将其轻轻摇晃30s，使之混和均匀，在20～25℃环境中温育20min；洗板机清洗反应板，每孔中加入100μL血清样37℃温育2h；洗板，37℃本，每孔加入l00μLHＲP标记二抗，温育30min；洗板，加显色液A和显色液B，各50μL，避光显色15min；加50μL终止液，酶标仪（EXL808，美国）读取450nmOD值；以OD值为纵坐标，以标准品为横坐标，绘制标准曲线，根据曲线方程求出样品所对应的浓度值。

1．7HE染色取多聚甲醛中固定的肾脏组织，流水冲洗1h，

80%、90%、100%酒精中，滤纸浸干，分别置于70%、二甲苯中

20min，浸蜡中3h，包埋机包埋，切片机切片，厚度4～6μm，将切片放入37℃烤箱中过夜，再分别2次放入二甲苯中进行脱蜡处理，完成脱蜡的切片放入浓度递减的梯度酒精中脱水，之后进行苏木素染色5min，酸化水反兰，伊红染1min，分别浸80%、90%、95%、100%酒精1min，二甲苯5min，中性树胶封

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片，光学显微镜下观察。

1．8WesternBlot检测大鼠心肌组织中CD133、VEGFＲ2的表达WesternBlot检测心脏组中血管内皮激活相关因子CD133、VEGFＲ2含量，具体操作如下：收集组织匀浆后，加入含有蛋白酶抑制剂的ＲIPA（Thermo，89900）裂解液中，冰上裂解30min后，23225）蛋白定量试收集上清液，使用BCA（Thermo，

SDS－PAGE电泳蛋白后剂盒对收集的蛋白液进行浓度测定，

VEGFＲ2（Abcam，进行转膜，加入CD133（Abcam，ab226355）、

ab111939）抗体；4℃孵育过夜，PBS清洗PVDF膜后，加入辣根过氧化物酶标记的二抗，室温孵育2h后，使用ECL发光试剂盒和凝胶成像系统对蛋白进行显色，结果使用ImageJ进行吸光度分析。

1．9ＲT－PCＲ检测大鼠心肌组织中CD133、VEGFＲ2的表达将收集的细胞和充分研磨的肾脏组织加入Trizol（Invitrogen，15596026）溶液中，按照Trizol试剂操作说明书进行分离提取组织和细胞中的总ＲNA，反转录合成第一链cDNA（Thermo，K1622）后，按照ＲT－PCＲ（Qiagen，204057）法检测CD133、VEGFＲ2反应参照试剂盒操作说明书配制，引物序列详见表1，由上海生工生物公司进行合成。反应条件为预变性：95℃30s；PCＲ反应：95℃5s，60℃20s，循环40次；融解曲线分

65℃15s，95℃5s。反应结束后确认扩增曲线析：95℃1s，

和融解曲线。

表1ＲT－PCＲ基因序列

基因VEFGＲ2CD133GAPDH

primer）（5’→3’

Forward：ATCGGTGAGAAAGCCTTGATCTCＲeverse：ATCGGTGAGAAAGCCTTGATCTCForward：CTGCAAACCCATGATTACAAGＲeverse：CCCTATGCCGAACCAGAACAGForward：AGACCTTCAACACCCCAGＲeverse：CACGATTTCCCTCTCAGC

统计学方法

数据采用SPSS19．0软件进行分析处理。数据表示为均

珋±s），采用重复测量设计方差比较组内数据，采数±标准差（x

用单因素方差分析组间数据变异，P＜0.05为差异有统计学意义。3结果

3．1实验动物存活情况LAD冠脉结扎术中及术后共死亡7只，死亡原因考虑大鼠LAD处于急性闭塞状态，大鼠死于大面

LBP组死亡1只，LBP积心肌坏死，实验期间MI组死亡2只，

MI组死亡大鼠术区局部化脓，考虑死亡原因与术区感染有关，MI组于组死亡大鼠考虑与急性心肌梗死有关，余组未见死亡，

LBP术后24h后出现精神萎靡，食欲不振，反应迟钝等症状，

sham组未见任何异常。组经药物干预后症状有所改善，

3．2模型评价体表心电图是临床诊断急性心肌梗死的第一手参考资料，急性心肌梗死患者常常表现为相应导联ST段抬高或压

LAD冠脉结扎前，低，大鼠心电监护示：窦性心律。LAD结扎30min后出现ST段的明显压低，提示建模成功。见插页ⅩLⅧ图1。3．3

心脏超声动态观察MI的主要病理特征是由于心肌丧失收缩功能所导致的左室收缩功能降低，血流动力学异常和左心室重构，临床上常常采用超声心动图来评价MI的病理特征，主要表现为心肌结构的改变和射血分数的降低，本研究发

MI组大鼠LVDD、LVDS明显升高，EF、FS现LAD冠脉结扎后，

LVDS变化不明明显降低，而LBP组大鼠经药物干预后LVDD、

MI急性期（术后3d～1周）MI组及显（P＞0.01vsMI组），

LBP组EF及FS无明显统计学差异（P＞0.01），而在MI慢性

LBP组大鼠EF及FS明显改善（P＜0.01vs期（术后2～4周），

MI组），结果提示LBP可以明显改善大鼠MI慢性期的左室收缩功能。但对改善心室重构作用不明显，其作用机制可能与增图3～图4。加心肌收缩力来实现的。见插页ⅩLⅧ图2、3．4

HE染色观察心肌形态学变化HE染色提示：sham组大

MI组大鼠鼠心肌细胞形态正常，结构排列规则，心肌梗死后，

P＞0.05。P＜0.05；#与sham组相比，注：*与sham组相比，图3

LVDS检测结果各组心肌梗死大鼠血浆LVDD、

P＜0.05；#与MI组相比，P＜0.05。注：*与sham组相比，图4

LVES检测结果各组心肌梗死大鼠血浆LVEF、

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可见心肌细胞肿胀，结构排列紊乱，梗死区域心肌纤维溶解、断

LBP组大鼠可见细胞肿胀程度不明显，裂，经枸杞多糖干预后，结构基本规则，坏死区域较小。提示枸杞多糖可以改善MI大鼠心肌损伤。见插页ⅩLⅧ图5。3．5

BNP浓度ELISA检测血清中cTnT、

cTnT是反应心肌损

BNP作为心力衰竭定伤程度重要标志物，当心肌损伤时入血，

量标志物，主要反应心室收缩及舒张功能障碍，常常用于反应MI后心肌细胞的延时损伤程度，本研究采用ELISA法检测各组大鼠血清中cTnT及BNP浓度变化趋势来评价枸杞多糖对MI大鼠心肌损伤程度及细胞延时损伤影响，结果发现LBP组大鼠血清中cTnT于心肌梗死后1周末开始下降（P＜0.05），而MI组则在术后4周末才出现下降趋势（P＜0.05），心梗后MI组大鼠BNP明显呈上升趋势（P＜0.05），而LBP组大鼠这种上升趋势不明显，这些结果提示枸杞多糖可以明显改善MI大鼠心肌损伤，降低心肌梗死后心肌细胞延时损伤程度。见图6。3．6

WesternBlot检测心肌组中CD133、VEGFＲ2含量CD133、VEGFＲ2作为内皮细胞的前体已经证实可以刺激内皮

心肌急剧坏死、心室重塑，心室收缩及舒张功能改变。其病理

机制是大量炎性纤维帽的易损斑块破裂，斑块表面侵蚀出血，内皮功能障碍，激活血小板及凝血功能异常导致的血栓急剧形成伴冠脉痉挛，目前认为内皮功能障碍在冠脉粥样硬化始发环节中至关重要

［8－9］

。有研究证实，内皮依赖性功能障碍往往比

动脉硬化出现更早，其主要功能有脂质的代谢调节，参与血管的生成、屏障及信息交换、血管收缩及舒张功能的调节、抗凝及炎性反应，这些作用在动脉斑块的形成及发展过程中非常明［10］显，血管内皮功能极易受机械因素及心血管疾病因子同时，影响而导致血管痉挛、血管平滑肌的增殖及血小板的激活与功

两者相互作用，共同参与动脉粥样硬化的形成和进展。能亢进，

因此改善血管内皮功能在急性心肌梗死治疗及改善预后方面

具有重要意义。本研究采用LAD结扎法建立急性心肌梗死大LAD结扎30min后心电监护提鼠模型为研究对象，结果发现，

BNP浓度明显升高。超声可示ST段明显下移，血清中cTnT、LVDS明显升高，EF、FS明显降低，见LVDD、病理学可见心肌

细胞肿胀，结构排列紊乱，梗死区域心肌纤维溶解、断裂。这些结果提示大鼠LAD结扎后，出现严重的心肌损伤及心室收缩及功能障碍。

”“真心痛”急性心肌梗死在中医学中属于“胸痹等范畴，

《素问·举痛论篇》“寒气入经而稽迟，中泣而不行……客于脉，。中则气不通，故猝然而痛”由此可知，其病机为“寒凝心脉”枸杞子为茄科植物枸杞的成熟果实，有研究发现其对寒凝瘀阻

［11－12］

。而枸杞多糖作为枸杞子中衰老大鼠心脏具有保护作用

LBP在心血管疾病方面，的有效成分，近年来发现，具有降血

脂、抗炎、抗动脉硬化等作用，与此同时枸杞多糖对细胞心肌超［13－14］

，微结构自由基的损伤具有保护作用本研究通过LBP对

MI大鼠进行干预，结果发现经LBP干预后，血清中cTnT于术

祖细胞（endothelialprogenitorcells，EPCs）分化为成熟内皮细

胞参与血管再生及内皮细胞增殖，本研究利用WesternBlot检VEGFＲ2含量来评价枸杞多糖对改善MI测心肌组中CD133、

大鼠心肌缺血损伤与激活内皮细胞的关系，研究发现心肌梗死MI组CD133、VEGFＲ2表达有所升高（P＜0.01，vssham后，

LBP组经药物干预后，CD133、VEGFＲ2表达增多明显高组），

vsMI组），于MI组（P＜0.01，这些结果提示LBP对MI大鼠心肌缺血的改善作用，可能通过增加CD133及VEGFＲ2表达，激活内皮细胞功能来实现的。见图7。3．7ＲT－PCＲ检测心肌组中CD133、VEGFＲ2含量由于缺血组中CD133及VEGFＲ2的表达与血管新生及血流再灌注密CD133、VEGFＲ2的高表达可能提示增切相关，在心肌梗死后，

LBP可能通过这种方加了心梗后新血管的再生及血流的关注，

式达到对梗死心肌的保护作用，为进一步证实WesternBlot对

CD133、VEGFＲ2蛋白检测结果，我们利用Ｒeal－timeＲT－PCＲ在mＲNA水平验证CD133及VEGFＲ2的表达趋势，结果显示mＲNA水平CD133、VEGFＲ2蛋白变化趋势与WesternBlot结果一致。见图8。4讨论

急性心肌梗死是冠状动脉发展到不稳定斑块破裂、冠状动脉内皮功能障碍，局部血栓快速形成所导致心肌急剧灌注不足或中断的冠脉急症，临床上根据体表心电图ST段的改变可分为ST抬高型心肌梗死及非ST段抬高型心肌梗死，主要表现为

后1周后开始回落，术后2～4周，超声提示LBP组大鼠EF及

FS明显改善，HE染色可见LBP组大鼠心肌细胞肿胀程度不明显，结构基本规则，坏死区域较小。这些结果提示LBP可以改善急性心肌梗死大鼠心肌缺血损伤及心室重构。李丽芳等利用LBP干预左主干结扎诱导急性心肌梗死大鼠发现LBP可以抑制大鼠心肌凋亡改善心室重构，这与本实验结果相符。内皮祖细胞（EPCs）可以分化为内皮细胞，具有干细胞的特性，通常情况下EPCs在骨髓微环境中处于相对静止状态，但在各种外界因素及内源性因子刺激下，动员入外周血，迁移，黏附在受损的血管壁，转化为功能细胞，促进局部血管的再生，EPCs与内皮细胞形成一个循环池，共同维持内皮下功能

［15－17］

。有研究表明在心肌损伤时，EPCs在归巢后会释放血

管生成因子（VEGF），在心肌损伤部位建立一个局部血管再生

图6BNP浓度变化趋势各组心肌梗死大鼠血清中cTnT、

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［6］赵子粼，许顶立．内皮祖细胞治疗急性心肌梗死后心功能改变的

．临床急诊杂志，2011，12（2）：142－144．研究进展［J］

．中［7］孙春玲，华山．细胞因子对急性心肌梗死的心肌修复作用［J］

2006，11（11）：1213－1217．国临床药理学与治疗学，［8］

THALMA，KＲISHNAMUＲTHYP，MACKIEAＲ，etal．En-hancedangiogenicandcardiomyocytedifferentiationcapacityofepige-neticallyreprogrammedmouseandhumanendothelialprogenitorcellsaugmentstheirefficacyforischemicmyocardialrepair［J］．CircＲes，111（2）：180－190．

图7

WesternBlot检测各组大鼠心脏内皮因子相关蛋白表达水平检测结果

［9］VASAM，FICHTLSCHEＲEＲS，AICHEＲA，etal．Numberand

migratoryactivityofcirculatingendothelialprogenitorcellsinverselycorrelatewithriskfactorsforcoronaryarterydisease［J］．CircＲes，2001，89（1）：E1－7．

［10］马灵筠，杨五彪，陈群力，等．构祀多糖对动脉粥样硬化内皮细

．辽宁中医杂志，2005，32（11）：胞功能及炎症反应的影响［J］1211－1213．

［11］WANGZ，LIUY，SUNY，etal．StructuralcharacterizationofLb-Gp1fromthefruitsofLyciumbarbarumL［J］．FoodChem，2014，159：137．

［12］陈立格．枸杞子的药理作用和临床应用价值分析［J］．世界最新

图8

ＲT－PCＲ检测各组大鼠心脏内皮

［18－22］

2015，15（59）：92．医学信息杂志，

［13］孟姣，孙传鑫，等．枸杞多糖药理作用研究进展［J］．时吕振宇，

2018，29（10）：2489－2493．珍国医国药，

［14］胡珍，樊官伟，等．中药对内皮祖细胞功能影响的研究覃小燕，

J］．中华中医药学刊，2019，37（4）：864－868．进展［

［15］ASAHAＲAT，MUＲOHAＲAT，SULLIVANA，etal．Isolationof

putativeprogenitorendothelialcellsforangiogenesis［J］．Science，1997，275（5302）：964－967．

［16］TAYLOＲDA，ＲESENDEM，SAMPAIOLC．MobilizingEPCs：

itisnotjustanacuteissue［J］．IntJCardiol，2018，257：272－273．

［17］ZHANGLC，FANW，BAOHF，etal．Neuroprotectiveroleofst-atinsinacutephaseofischemicstroke［J］．ChinPharmJ（中国药2014，49（22）：2018－2022．学杂志），

［18］PEICHEVM，NAIYEＲAJ，PEＲEIＲAD，etal．Expressionof

VEGFＲ－2andAC133bycirculatinghumanCD34（+）cellsiden-tifiesapopulationoffunctionalendothelialprecursors［J］．Blood，2000，95（3）：952－958．

［19］

CＲITICALLEGISCHAEMIA．CardiolＲesPract，2012．2012：143209．Hristov，M，W．Erl，andP．C．Weber，Endothelialpro-genitorcells：mobilization，differentiation，andhoming［J］．Arterio-sclerThrombVascBiol，2003，23（7）：1185－1189．

［20］MASSAM，ＲOSTIV，FEＲＲAＲIOM，etal．Increasedcirculating

hematopoieticandendothelialprogenitorcellsintheearlyphaseofacutemyocardialinfarction［J］．Blood，2005，105（1）：199－206．

［21］SCHOMIGK，BUSCHG，STEPPICHB，etal．Interleukin－8is

associatedwithcirculatingCD133+progenitorcellsinacutemyo-cardialinfarction［J］．EurHeartJ，2006，27（9）：1032－1037．

［22］PACZKOWSKAE，LAＲYSZB，ＲZEUSKIA，etal．Humanhema-topoieticstem/progenitor－enrichedCD34（+）cellsaremobilizedintoperipheralbloodduringstressrelatedtoischemicstrokeoracutemyocardialinfarction［J］．EurJHaematol，2005，75（6）：461－467．

［23］UＲBICHC，DIMMELEＲS．Endothelialprogenitorcells：character-izationandroleinvascularbiology［J］．CircＲes，2004，95：343－353．

因子相关蛋白表达水平检测结果

。EPCs的动员主要通过VEGFＲ2微环境，改善心肌损伤

及其受体CXCＲ4的相互协调作用实现，而CD133作为EPCs

［23］的主要标志物，可以一定程度上反应EPCs功能。本研究通过采用WesternBlot法检测大鼠心肌组织中VEGFＲ2及CD133

VEGFＲ2表的表达，发现心肌梗死后大鼠心肌组织中CD133、

CD133、VEGFＲ2表达增多明显高达有所升高，经LBP干预后，于MI组，我们进一步证实这一结果，我们利用Ｒeal－time

ＲT－PCＲ在mＲNA水平验证CD133及VEGFＲ2的表达趋势与WesternBlot结果一致，提示LBP可以改善心肌梗死后大鼠心肌损伤，可能是通过激活内皮细胞功能建立损伤心肌局部新生血管微环境来实现的。

LBP可以改善心肌梗死后大鼠局部的心肌缺血综上所述，

及损伤，维持大鼠心室收缩及舒张功能，其作用机制可能通过动员骨髓中EPCs分化成内皮细胞，促进VEGFＲ2释放，建立局部损伤心肌新生血管微环境来实现的，这一发现为心肌梗死的防治提供新思路。参考文献

［1］JINM，HUANGQ，ZHAOK，etal．Biologicalactivitiesandpoten-tialhealthbenefiteffectsofpolysaccharidesisolatedfromLyciumbar-barumL［J］．IntJBiolMacromol，2013（54）：16．

［2］CHENGJ，ZHOUZW，SHENGHP，etal．Anevidence－based

updateonthepharmacologicalactivitiesandpossiblemoleculartargetsofpolysaccharides［J］．DrugDesDevelTher，2015，9：33．

［3］CHANGＲC，SOKF．Useofanti－agingherbalmedicine，Lycium

barbarum，againstaging－associateddiseases．Whatdoweknowsofar［J］．CellMolNeurobiol，2008，28（5）：643．

［4］马灵筠，杨五彪，陈群力，等．枸杞多糖对动脉粥样硬化内皮细

．辽宁中医杂志，2005，32（11）：胞功能及炎症反应的影响［J］1211－1213．

［5］陈鹏，张敏州．通冠胶囊对冠心病PCI术患者外周血内朱初麟，

．中国中西医结合杂志，2013，33（7）：皮祖细胞数量的影响［J］873－877．

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第39卷第4期

CHINESE

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