人教版高中生物选修三
专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具
课下提能
一、选择题
1．下列关于限制酶的说法正确的是( ) A．限制酶主要是从真核生物中分离纯化出来的 B．一种限制酶通常只能识别一种特定的核苷酸序列 C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键
[解析]选B 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，A错误；一种限制酶通常只能识别一种特定的核苷酸序列，B正确；DNA分子经限制酶切割后会形成黏性末端或平末端，C错误；限制酶的作用部位是双链DNA分子特定核苷酸之间的磷酸二酯键，D错误。
2．(2024·扬州期末)下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述正确的是( ) A．用限制酶剪切获得一个目的基因时得到两个切口，有2个磷酸二酯键被断开
B．限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大 C．序列—CATG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数不同 D．T4DNA连接酶和E·coli DNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接 [解析]选B 用限制酶剪切获得一个目的基因时得到两个切口，有4个磷酸二酯键被断开，A错误；限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大，B正确；序列—CATG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数相同，都是4个，C错误；T4DNA连接酶和E·coli DNA连接酶都能催化黏性末端的连接，其中只有T4DNA连接酶还可以连接平末端，D错误。
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3．(2024·深圳期末)下列关于基因工程中的DNA连接酶的叙述不正确的是( )
A．DNA连接酶的化学本质是蛋白质
B．DNA连接酶能够连接两个DNA片段之间的磷酸二酯键 C．基因工程中可以用DNA聚合酶替代DNA连接酶
D．根据来源不同，DNA连接酶可分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶两大类
[解析]选C DNA连接酶的化学本质是蛋白质，根据来源不同可分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶两大类，DNA连接酶连接的是两个DNA片段之间的磷酸二酯键，而DNA聚合酶连接的是DNA片段与游离的脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，因此在基因工程中不能用DNA聚合酶替代DNA连接酶。
4．下列关于DNA连接酶的相关叙述，正确的是( ) A．DNA连接酶需要模板，连接的是两条链碱基对之间的氢键 B．DNA连接酶连接的是黏性(平)末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖 C．T4DNA连接酶只能连接黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖 D．E·coli DNA连接酶既能连接平末端，又能连接黏性末端
[解析]选B DNA连接酶不需要模板，催化形成的是磷酸二酯键，A错误；DNA连接酶连接的是黏性(平)末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖，使两者之间形成磷酸二酯键，B正确；T4DNA连接酶既可以连接黏性末端，也可以连接平末端，连接的是两条链主链上的磷酸和脱氧核糖，C错误；E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端，D错误。
5．(2024·太原一模)研究人员想将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，以表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因不插入到基因A、B中，而大肠杆菌不带任何抗性基因，则筛选获得“工程菌”的培养基中应加抗生素( )
A．仅有链霉素 B．仅有氨苄青霉素
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C．同时有链霉素和氨苄青霉素 D．无链霉素和氨苄青霉素
[解析]选C 分析题意可知，质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因不插入到基因A、B中，即目的基因的插入不会导致标记基因失活。由于“工程菌”中具有两种标记基因即抗性基因，所以在培养基中同时加入这两种抗生素，即可挑选出相应的工程菌。
6．下列有关基因工程的叙述，错误的是( ) A．最常用的载体是质粒
B．工具酶主要有限制性核酸内切酶和DNA聚合酶
C．该技术人为地增大了生物变异的范围，实现了种间遗传物质的交换 D．基本原理是基因重组
[解析]选B 基因工程中最常用的载体是质粒，A正确；基因工程的工具主要有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体，其中限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两种工具酶，B错误；基因工程可按照人们的意愿定向改造生物的性状，这人为地增大了生物变异的范围，实现了种间遗传物质的交换，C正确；基因工程的基本原理是基因重组，D正确。
7．(2024·河西三模)如图为限制酶BamHⅠ和BglⅡ的识别序列及切割位点，实验中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并将它们拼接得到重组质粒。下列相关叙述正确的是( )
A．在酶切过程中，要控制好酶的浓度、温度和反应速率等因素 B．经两种酶处理得到的重组质粒不一定能再被这两种酶所识别 C．目的基因经BglⅡ切割后形成的黏性末端是—CTACG D．分别用两种限制酶切割，保证了目的基因定向插入质粒
[解析]选B 影响酶促反应的因素有温度、pH、酶浓度、底物浓度等，因此
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酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素，A错误；经两种酶处理得到的重组质粒不一定能再被这两种酶所识别，B正确；目的基因经BglⅡ切割后形成的黏性末端是—CTAG，C错误；分别用两种限制酶切割DNA和质粒，由于形成的黏性末端相同，因此并不能保证目的基因定向插入质粒，D错误。
8．(2024·启东期末)如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是( )
A．DNA连接酶、限制酶、解旋酶 B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C．限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D．解旋酶、限制酶、DNA连接酶
[解析]选D ①是氢键，是解旋酶的作用位点；②是磷酸二酯键，限制酶可将其断裂；③是DNA连接酶，可将DNA片段之间的磷酸二酯键连接起来。
9．如图是4种限制酶的识别序列及其酶切位点，下列叙述错误的是( )
A．不同类型的限制酶切割后，有的产生黏性末端，有的产生平末端 B．不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端
C．用酶1和酶2分别切割目的基因和质粒，连接形成重组DNA分子后，重组DNA分子仍能被酶2识别
D．用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后，其产物经T4DNA连接酶催化不能连接形成重组DNA分子
[解析]选D 不同类型的限制酶切割后，有的产生黏性末端(酶1和酶2)，有的产生平末端(酶3和酶4)，A正确；不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端，如题图中的酶1和酶2，B正确；用酶1和酶2分别切割目的基因和
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质粒，形成的末端序列相同，连接形成重组DNA分子后，重组DNA分子仍能被酶2识别，C正确；用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后，其产物经T4DNA连接酶催化可以连接形成重组DNA分子，这是因为T4DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端，D错误。
10．下列四条DNA片段中可能是由同一种限制酶切割而成的是( )
A．①② C．③④
B．②③ D．②④
[解析]选D 只有②和④的黏性末端的碱基是互补的，可能是由同一种限制酶切割而成的。
11．图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是( )
A．图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，含有4个游离的磷酸基团 B．在构建重组质粒时，可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA C．用PstⅠ和Hind Ⅲ切，可以保证重组DNA序列的唯一性 D．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长
[解析]选C 甲中的质粒只有一个BamHⅠ切割位点，切割后形成一个直链DNA，含2个游离的磷酸基团，A错误；BamHⅠ切割位点在目的基因上，不能用该酶切割外源DNA，B错误；用PstⅠ和HindⅢ切割质粒切成两个片段，用PstⅠ和Hind Ⅲ能将外源DNA切开，只有含目的基因的片段通过DNA连接酶与质粒连接形成的重组质粒符合要求，从而保证重组DNA序列的唯一性，C正确；导入目的基因的大肠杆菌，其重组质粒是用PstⅠ和Hind Ⅲ切割的，其中的
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人教版高中生物选修三课下提能：专题1 1.1 DNA重组技术的基本工具 Word版含解析
