HPLC同时测定不同产地滇重楼中的6种重楼皂苷
李 懿1， 何 佳1， 赵庭周1， 杨永红2， 苏 豹1， 马 青1， 韦建荣1* 【摘 要】摘要:目的 对不同产地滇重楼的质量进行评价研究，摸清目前云南省境内的滇重楼资源情况，为滇重楼资源合理利用和保护提供科学依据。方法 收集产自云南省境内13个州(市、地区)的滇重楼样品进行分析，采用HPLC方法测定其6种重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ，Ⅵ，Ⅶ，PA，H。结果 不同产地滇重楼皂苷含量差异较大。结论 重楼皂苷质量受产地、环境因素影响较大，滇重楼品质表现出一定的地域及生境依赖性。 【期刊名称】中成药
【年(卷),期】2012(034)001 【总页数】4
【关键词】关键词:滇重楼;皂苷;质量评价 滇重楼为百合科植物云南重楼
Paris polyphylla Smith
var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.的干燥根茎，极具药用价值，主要分布在我国滇、川地区，具有清热解毒、消肿止痛、平喘止咳、凉肝定惊之功效，多用于疔疮痈肿、咽喉肿痛、虫蛇咬伤、跌打伤痛等症［1-2］。现代化学研究，已从重楼属植物中分离鉴定出50余种化合物，其中主要成分为甾体皂苷类，约占总化合物数目的80%，并含有甾醇、甾醇苷、黄酮苷、C21孕甾烷型苷等。甾体皂苷是其主要活性成分，其苷元主要为异螺甾烷醇类的薯蓣皂苷元和偏诺皂苷元［4-8］。本研究中重楼皂苷Ⅵ，Ⅶ，PA，H 属于偏诺皂苷，重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ属于薯蓣皂苷［2-3］，目前文献对重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ，Ⅵ，Ⅶ研究较多，对重楼皂苷PA，H的研究相对较少。现代药理研究表明，重楼属药材具有抗肿瘤、
抗菌消炎、止血、镇静镇痛、抑制精子活性、抗细胞毒、免疫调节等广泛的药理活性［9］。
由于滇重楼繁殖率低，其传统药用部位根茎的自然生长速度十分缓慢，从种子生长为药用商品，一般需10～15年，野生重楼资源再生较慢。近年来随着药用范围不断扩大，对商品药材需求量逐年增加，现有药源远不能保障市场需要，仅靠野生资源已不能满足工业化生产，加之主产区乱采滥挖，忽视对滇重楼资源的保护和繁育，野生种质资源遭到严重破坏，逐年的大量采挖已使野生滇重楼资源日趋枯竭，从而诱发滇重楼价格不断攀升，在此情况下，摸清目前滇重楼资源情况具有重要意义;通过走访滇重楼的传统产区，实地采集标本，收集样品，对不同产地的滇重楼资源进行质量评价，全面掌握目前滇重楼资源状况，为有效保护和合理利用滇重楼资源收集资料并提供科学依据。
1 药材与试剂
1.1 药材来源 分析样品产自云南省境内13个州(市、地区)，涉及约75个采集点，采集重楼属植物植株292株，所有标本具有标签及原植株生境照片，同时记录来源、生境、气候、地形、土壤、植被、海拔等相关信息，资料现收藏于云南白药研究院;共获得分析样品69份，样品经云南白药集团股份有限公司赵庭周工程师、云南农业大学杨永红教授鉴定，其中56份为重楼属药用植物滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis。
1.2 仪器与试剂 高效液相色谱仪(Agilent 1100)，自动进样器，DAD检测器。乙腈为色谱纯，水为三蒸水。重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ，Ⅵ，Ⅶ对照品购自中国药品生物制品检定所(批号 111590-200402，111591-200402，111592-200402，111593-200402);重楼皂苷PA，H对照品，购于中国科学院昆明植物研究所。
2 方法与结果
2.1 样品处理 新鲜植株采集后除去泥沙等杂质，取根茎，减压下40℃烘干，粉碎，细粉分包密闭后－20℃保存备用。 2.2 定量测定
2.2.1 色谱条件 Agilent SB-C18色谱柱(250×4.6 mm，5 μm);流动相为乙腈(A)-水(B)，梯度洗脱，0～10 min，5% ～20%A，10～50 min，20% ～42%A，50～90 min，42% ～80%A，90～100 min，80%～95%A，洗脱时间为100 min;检测波长203 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温30 ℃，进样量10 μL。
2.2.2 线性关系 分别取在40℃下减压干燥的重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ，Ⅵ，Ⅶ，PA，H对照品适量，精密称定，用甲醇制成0.4 mg/mL的对照品溶液，分别进样4、8、12、14、16、20 μL，得到回归方程为:AⅠ =561.18 CⅠ +16.2，r=0.9998;AⅡ =539.73CⅡ +14.4，r=0.9994;AⅥ =645.0.7CⅥ +13.2，r=0.9992;AⅦ =462.4CⅦ +19.8，r=0.9995;APA=603.16CPA+20.1，r=0.9997;AH=617.69CH+14.6，r=0.9993。
2.2.3 精密度、稳定性、重复性、回收率试验 6种重楼皂苷的精密度、稳定性、重复性的RSD范围分别为 0.97% ～ 1.32%，1.34% ～ 1.69%，1.17% ～1.52%，表明精密度、稳定性、重复性良好;重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ，Ⅵ，Ⅶ，PA，H 加样回收率分别为:98.73%，98.17%，98.86%，98.01%，98.92%，98.33%，加样回收率的 RSD范围分别为 1.01% ～1.37%，0.74% ～ 1.21%，1.07% ～ 1.44%，1.15% ～1.68%，0.94% ～1.56%，1.33% ～1.82%。
2.2.4 样品测定 对照品溶液和供试品溶液的制备按2010年版《中国药典》一
HPLC同时测定不同产地滇重楼中的6种重楼皂苷
