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第八章荧光免疫技术
FluoreSCenCe ImmunoaSsay
第一部分 目的要求和教学内容
一、目的要求
掌握：荧光免疫技术原理、类型及临床应用，常用的荧光物质；熟悉：荧光免疫技术 的技术要点；了解：荧光标记物的制备与保存，镧系稀土元素标记物的制备，荧光免疫技 术主要类型的技术要点。 二、教学内容
1．荧光标记物的制备：荧光和荧光物质，荧光标记物的制备。
2．荧光免疫显微技术：基本原理，技术类型，技术要点，方法评价，临床应用。 3．荧光免疫测定技术：时间分辨荧光免疫测定(基本原理，技术类型，技术要点， 方法评价和临床应用)；荧光偏振免疫测定(基本原理，技术类型，技术要点，方法评价 和临床应用)。
第二部分 测 试 题 一、选择题
(一)单项选择题(A型题)
1.如下有关荧光免疫技术正确的提法 A．直观性检测抗原和抗体 B．直观性检测抗原 C．直观性检测抗体
D．间接检测抗原或抗体
E．间接检测抗原和抗体
2．荧光素易受温度影响，操作时通常选择较佳的温度 A．10～15℃ B．15～20℃ C．20～25℃
D．25～30℃ E．30～35℃
3．荧光抗体保存3～4年，应选择 A．小量分装、4℃ B．瓶分装、4℃ C．瓶分装、-10℃
D．瓶分装,-20℃ E．小量分装、-20℃
4．下列组成荧光显微镜的结构中，与普通光学显微镜相同的是 A．光源 B．聚光器 C．目镜
D．物镜 E．滤光片
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5．下列哪项方法不属于荧光免疫显微技术类型
A．直接法 B．夹心法 C．间接法
D．补体法 E．双标记法
6．荧光抗体染色标本的观察时间
A．当天 B.第二天 C．第三天
D．1周内 E．5天
7．荧光抗体闭接法应标记
A．抗原 B．抗体 C．补体
D．抗抗体 E．抗体及补体
8．荧光显微技术常用于检验血清中各种自身抗体和多种病原体抗体的方法是
A．直接法
B．间接法 C．双抗体夹心法
D．补体法 E．双标记法
9．荧光抗体间接法可检测
A．抗原 B．抗体 C.补体
D．蛋白质 E．抗原和抗体
lO．在荧光显微镜检查中直接影响检测结果的是
A．抗原荧光染色 B．抗体荧光染色 C．补体荧光染色
D．特异性荧光染色 E．非特异性荧光染色
11．主要用于测定各种激素、蛋白质、酶、药物及病毒抗原的技术
A．荧光偏振免疫测定 B．荧光免疫显微技术
C．时间分辨荧光免疫测定 D．底物标记荧光免疫测定 E．流式荧光免疫技术
12．临床药物浓度检测的首选方法
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A．时间分辨荧光免疫测定
B．荧光偏振免疫测定 C．荧光免疫显微技术 D．流式荧光免疫技术 E．底物标记荧光免疫测定
13．最适合于时间分辨荧光免疫测定的荧光物质
A．异硫氰酸荧光素 B．四乙基罗丹明 C．四甲基异硫氰酸罗丹明 D．藻红蛋白 E．镧系稀土元素(Eu)
14．去除过度标记的荧光抗体最好用
A.搅拌法 B.透析法 C.盐析法
D.凝胶过滤法 E.离子交换层析法
15．目前使用最广泛的荧光色素为 A.FITC B.RB200 C.TRITC
D.R-RE E.Eu3+
16．免疫标记技术中发展最早的技术是
A.酶免疫技术
B.同位素标记的免疫技术 C.化学发光免疫技术 D.荧光免疫技术 E.免疫金银技术
17．作为荧光抗体标记的荧光物质必须具备的条件中，与提高观察效果有关的是
A.必须有活性化学基团 B.性质稳定 C.荧光效率高
D.不影响蛋白质的活性 E.标记方法简便快速
18．决定荧光效率的因素主要是
A.物质本身的物理特性 B.激发光的波长 C.激发光的强度 D.溶剂pH E.溶剂极性
19．荧光显微镜光路形式为
A 衍射光、落射光 B.折射光、透射光
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C. 透射光、落射光 D.折射光、衍射光 E .散射光、衍射光
20．RB200产生的荧光色泽为
A.橘红色 B.黄绿色 C.蓝紫色
D.天青色 E.褐黑色
21．落射式荧光显微镜的吸收滤片应安装在
A.激发滤片与分色镜之间 B.分色镜与目镜之间 C.物镜与分色镜之间 D.物镜与载玻片之间 E.光源与激发滤片之间
22．能用于抗原定位检测的实验为
A.直接法荧光抗体染色 B.TRFIA C.荧光偏振免疫分析
D.ELISA E.免疫比浊分析
23．间接法荧光抗体染色与直接法相比,优点为
A.非特异性荧光染色少 B.操作更简便
C.可用于抗原的定位检测 D.可用于抗原定性检测
E.检测不同的抗原,只需制备一种荧光抗体 24．荧光免疫技术中,应用最广泛的金属元素为 A.Tb B.Ce C.Eu D.Au E.Zn
25．关于直接法荧光抗体染色的特点,错误的是
A.简单易行,特异性高 B.敏感度偏低
C.非特异性荧光染色因素少 D.可检测抗原及抗体
E.每检测一种抗原需制备一种相应的荧光抗体 26．临床常用的荧光猝灭剂不包括
A.亚甲蓝 B.甲基红 C.碱性复红 D.伊文思蓝
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E.碘溶液
27．荧光显微镜观察时的注意事项错误的是
A.暗室内观察
B.染色后标本立即观察 C.37℃观察,效果最好
D.不宜长时间观察一个视野 E.宜用无荧光镜油
28．荧光显微镜与普通光学显微镜的不同之处错误的是
A.光源 B.滤片 C.聚光镜 D.电源 E.镜头
29.不宜用于荧光抗体染色的标本是
A.血涂片 B.肝印片
C.肿瘤切除物切片 D.细菌涂片 E.尿液
30.下述物质不是荧光色素的是
A.异硫氰酸荧光素 B.四乙基罗丹明
C.四甲基异硫氰酸罗丹明 D.四甲基伞酮-β-D半乳糖苷
E.藻红蛋白
(二)多项选择题(x型题)
1．对荧光标记物影响的因素有 A．pH、温度
B．溴化物、碘化物等杂质 C．荧光素的浓度
D．细胞固定剂 E．化合物
2．常用的荧光素是指
A．异硫氰酸荧光素 B．四乙基罗丹明 C．四甲基异硫氰酸罗丹明 D．藻红蛋白 E．镧系稀土元素(Eu2+)
3．有关荧光显微技术中制作组织标本过程要求
A．尽量保持抗原完整性 B．切片尽量薄
C．用丙酮或乙醇固定 D．制好的标本尽快染色
E．制好的标本无法及时染色，应置-20℃下低温干燥保存
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第八章荧光免疫技术
