Lager酵母中CRISPR-Cas9基因敲除系统的构建
李梦琦; 张可心; 郑飞云; 钮成拓; 刘春凤; 李崎; 王金晶
【期刊名称】《东北农业大学学报》 【年(卷),期】2020(051)003
【摘要】利用CRISPR-Cas9基因编辑技术在Lager型啤酒酵母(Saccharomyces pasteurianus)中建立CRISPR-Cas9基因敲除系统.将质粒pMY中毕赤酵母基因表达系统中常用GAP启动子替换为酿酒酵母基因表达系统中常用PGK1启动子,增强外源基因表达量.设计酿酒酵母(S.cerevisiae)基因组及真贝酵母(S.eubayanus)基因组中目的基因TRP1小向导RNA.增加向导RNA结构中锤头状核酶和肝炎三角洲病毒核酶结构,提高gRNA转录水平.Lager型啤酒酵母Pilsner中TRP1基因被敲除,成功构建Lager型啤酒酵母中CRISPR-Cas9基因敲除系统. 【总页数】10页(36-44,96)
【关键词】Lager酵母; CRISPR-Cas9; 基因敲除; S.pasteurianus 【作者】李梦琦; 张可心; 郑飞云; 钮成拓; 刘春凤; 李崎; 王金晶
【作者单位】江南大学生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122; 江南大学酿酒科学与工程研究室 江苏 无锡 214122 【正文语种】中文 【中图分类】TS262.5 【相关文献】
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Lager酵母中CRISPR-Cas9基因敲除系统的构建
